2009年7月22日 星期三

實驗室的訓練~part3

這次來寫寫有關實驗室裡最重要但也是最平常的雜事~滅菌

千萬不要小看滅菌這門學問,因為滅菌滅的好~包你實驗不出包,如果平常沒有養成好習慣的話,troubleshooting絕對會保證你做不完,廢話不多說了,直接講重點囉

實驗室要滅菌的東西不外乎就是些buffer、tip、或是如果有做動物實驗的話有用到的手術用品之類的,手術用品類的很簡單,清洗乾淨後用鋁箔紙包一包就可以拉,而一般來說我們不管滅甚麼東西我們都會在外層貼一小片滅菌膠帶,這種膠帶使用方式是一次剪一小片條紋狀的下來,因為那個條帶在受熱後會變成黑色的,我們就可以靠這個來確認這個東西是否已經滅過了,而滅菌鍋有分水平式的和直立式的,小弟我自己是兩種都用過,使用方式也大同小異,都是加水,關氣門和水門,旋緊門閥後再按開始紐就可以了,而滅菌的條件通常都已經設定好了,121度高溫高壓滅上二十分鐘,等氣壓和溫度慢慢降下來到適當的溫度時就可以囉。

使用滅菌鍋最常出現的問題有幾個,第一種就是水閥和氣門沒關緊,通常這種機器在你開始滅之後幾分鐘就會開始狂叫了,所以這時候就是把東西再用好就好,另外一種就是像潛水艇裡的那個門閥,有的是單一的旋轉鈕,而有的又是對稱型的,總之就是一件事,把他鎖緊而且要對稱鎖,要不然滅到一半可是會有漏氣爆炸的危險喔,補水的話一般都是以一次水也就是RO水即可,清洗的話用自來水寫可,每一次滅菌間不需換水,但遇到滅過感染性的或是菌類的東西都需要把水流掉換乾淨的喔,這樣才是有公德心的好表現喔。

最後當然要提一下重點和操作細節囉,滅tip時基本上最大的問題就是放下層的tip盒常常會感覺好像浸水一般,這是因為滅菌鍋的水氣跑進去的關係,所以通常會建議tip盒盡量擺高一點或者擺第二層。而滅buffer的務必要把瓶子的紐旋鬆喔,要不然會無法達到滅菌的功效以及也會有爆炸的危險,空瓶也是如此,但等到滅完後記得要趕快把蓋子關緊喔!!基本上實驗室大部分東西都可以經過滅菌的處理,但是某些特別的東西,像是營養源、比如像糖類或medium的就不能經過高溫滅菌的處理,那就可能要經過抽氣過濾的方式來隔離細菌囉。至於滅菌完的東西一般來說就是送進烘箱烘乾,而如果發現到有未乾的東西則是要整個東西再拿回去重滅喔,因為那個品質已經不能信任了。
ps:烘箱大致上都分好幾層,從上面往下溫度是越來越高,最下層通常是不宜放塑膠製品的,因為容易融化損壞。

會想寫這篇的原因主要是滅菌通常是剛進去時最先開始學的東西之一,因為他算是實驗室的重要雜事,幾乎三不五時就會用到,而那麼簡單的步驟和基本需知卻還是有人會搞錯,所以還是多寫出來給大家看看囉。

by Vanness

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